干熱滅菌法
一、經(jīng)過運(yùn)用干熱空氣殺滅微生物的辦法叫干熱滅菌。通常是把待滅菌的物品包裝安排妥當(dāng)后, 放入電烘箱中烘烤,即加熱**160~170℃保持1~2h。
二、干熱滅菌法常用于空玻璃器皿、金屬用具的滅菌。凡帶有膠皮的物品,液體及固體培養(yǎng)基等都不能用此法滅菌。 三、滅菌辦法:
1、玻璃器皿等在滅菌前有必要經(jīng)準(zhǔn)確包裹和加塞,以保證玻璃器皿于滅菌后不被外界雜菌所污染。常用玻璃器皿的包扎和加塞辦法如下:平皿用紙包扎或裝在金屬平皿筒內(nèi);三角瓶在棉塞與瓶口外再包以厚紙,用棉繩以活結(jié)扎緊,以防滅菌后瓶口被外部雜菌所污染;吸管以拉直的曲別針一端放在棉花的基地,悄悄捅入管口,松緊有必要適中,管口顯露的棉花纖維一致經(jīng)過火焰燒去,滅菌時將吸管裝入金屬管筒內(nèi)進(jìn)行滅菌,也可用紙條斜著從吸管**包起,逐漸向上卷,頭端的紙卷捏扁并擰幾下,再將包好的吸管集中滅菌。 2、枯燥箱滅菌
將包扎好的物品放入枯燥烘箱內(nèi),留意不要擺放太密,避免阻礙空氣流通;不得使器皿與烘箱的內(nèi)層底板直接觸摸。將烘箱的溫度升**160~170℃并恒溫1~2h,留意勿使溫度過高,超越170℃,器皿外包裹的紙張、棉花會被烤焦焚燒。假如是為了烤干玻璃器皿,溫度為120℃繼續(xù)30分鐘即可。溫度降**60~70℃時方可翻開箱門,取出物品,不然玻璃器皿會因驟冷而爆裂。 用此法滅菌時,jue不能用油、蠟紙包扎物品。 3、火焰滅菌
直接用火焰灼燒滅菌,敏捷徹底。關(guān)于接種環(huán),接種針或其它金屬用具,可直接在酒精燈火焰上燒**紅熱進(jìn)行滅菌。此外,在接種過程中,試管或三角瓶口,也選用經(jīng)過火焰而到達(dá)滅菌的意圖。
濕熱滅菌
一、 煮沸消毒法
注射器和解剖器械等均可選用此法。先將注射器等用紗布包好,然后放進(jìn)煮沸消毒器 內(nèi)加水煮沸。關(guān)于細(xì)菌的養(yǎng)分體煮沸約15~30min,關(guān)于芽孢則需煮沸約1~2h。
二、高壓蒸汽滅菌法
高壓蒸汽滅菌用處廣,效率高,是微生物學(xué)試驗(yàn)中**常用的滅菌辦法。這種滅菌辦法 是根據(jù)水的沸點(diǎn)跟著蒸汽壓力的增加而增加的原理規(guī)劃的。當(dāng)蒸汽壓力到達(dá)1.05kg/cm2時, 水蒸氣的溫度增加到121℃,經(jīng)15~30min,可悉數(shù)殺死鍋內(nèi)物品上的各種微生物和它們的 孢子或芽孢。通常培養(yǎng)基、玻璃器皿以及傳染性標(biāo)本和廠服等都可使用此法滅菌。
操作辦法和留意事項(xiàng)如下:
(1)加水 :翻開滅菌鍋蓋,向鍋內(nèi)加水到水位線。立式消毒鍋**好用已煮開過的水,以便
削減水垢在鍋內(nèi)的積存。留意水要加夠,避免滅菌過程中干鍋。
(2)裝料、加蓋 :滅菌資料放好后,封閉滅菌器蓋,選用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋,
使蒸汽鍋密閉,勿使漏氣。
(3) 排氣 :翻開排氣口(也叫放氣閥)。用電爐加熱,待水煮沸后,水蒸氣和空氣一同從排
氣孔排出,當(dāng)有大量蒸汽排出時,保持5min,使鍋內(nèi)冷空氣徹底排凈。 (4)升壓、保壓和降壓
當(dāng)鍋內(nèi)冷空氣排凈時,即可封閉排氣閥,壓力開端上升。當(dāng)壓力上升**所需壓力時,操控電壓以保持恒溫,并開端核算滅菌時刻,待時刻到達(dá)請求(通常培養(yǎng)基和器皿滅菌操控在121℃,20min)后,中止加熱,待壓力降**挨近“0”時,翻開放氣閥。留意不能過早過急地排氣,不然會因?yàn)槠績?nèi)壓力降低的速度比鍋內(nèi)慢而形成瓶內(nèi)液體沖出容器以外。