干熱滅菌法驗(yàn)證與濕熱滅菌法相同，應(yīng)進(jìn)行熱分布試驗(yàn)、熱穿透試驗(yàn)、生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)或細(xì)菌內(nèi)毒素滅活驗(yàn)證試驗(yàn)。以確認(rèn)滅菌柜中的溫度分布符合設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)、確定**冷點(diǎn)位置、確認(rèn)**冷點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（FH）能達(dá)到設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)并達(dá)到SAL要求。常用的生物指示劑為枯草芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus subtilis)。細(xì)菌內(nèi)毒素滅活驗(yàn)證試驗(yàn)是證明除熱原過(guò)程有效性的試驗(yàn)。一般將不小于1000單位的細(xì)菌內(nèi)毒素加入待去熱原的物品中，證明該去熱原工藝能使內(nèi)毒素**少下降3個(gè)對(duì)數(shù)單位。細(xì)菌內(nèi)毒素滅活驗(yàn)證試驗(yàn)所用的細(xì)菌內(nèi)毒素一般為大腸桿菌內(nèi)毒素（Escherichia coli endoxin）。驗(yàn)證時(shí)，一般采用**大裝載方式。 #p#分頁(yè)標(biāo)題#e#
本法系指將滅菌產(chǎn)品置于適宜放射源輻射的γ射線或適宜的電子加速器發(fā)生的電子束中進(jìn)行電離輻射而達(dá)到殺滅微生物的方法。本法**常用的為60Co-γ射線輻射滅菌。醫(yī)療器械、容器、生產(chǎn)輔助用品、不受輻射破壞的原料藥及成品等均可用本法滅菌。
采用輻射滅菌法滅菌的無(wú)菌產(chǎn)品其SAL應(yīng)≤10-6。γ射線輻射滅菌所控的參數(shù)主要是輻射劑量（指滅菌物品的吸收劑量）。該劑量的制定應(yīng)考慮滅菌物品的適應(yīng)性及可能污染的微生物**大數(shù)量及**強(qiáng)抗輻射力，所使用的劑量事先應(yīng)驗(yàn)證其有效性及安全性。常用的輻射滅菌吸收劑量為25kGy。對(duì)**終產(chǎn)品、原料藥、某些醫(yī)療器材應(yīng)盡可能采用低輻射劑量滅菌。滅菌前，應(yīng)對(duì)被滅菌物品微生物污染的數(shù)量和抗輻射強(qiáng)度進(jìn)行測(cè)定，以評(píng)價(jià)滅菌過(guò)程賦予該滅菌物品的無(wú)菌保證水平。 滅菌時(shí)，應(yīng)采用適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)或物理方法對(duì)滅菌物品吸收的輻射劑量進(jìn)行監(jiān)控，以充分證實(shí)滅菌物品吸收的劑量是在規(guī)定的限度內(nèi)。如采用與滅菌物品一起被輻射的放射性劑量計(jì)，劑量計(jì)要置于規(guī)定的部位。在初安裝時(shí)劑量計(jì)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)源進(jìn)行校正，并定期進(jìn)行再校正。
認(rèn)空載和裝載時(shí)滅菌腔內(nèi)的輻射劑量的分布圖、滅菌物品的吸收劑量及**大和**小吸收劑量的分布、滅菌物品的均一性、滅菌腔內(nèi)物品的裝載方式等。常用的生物指示劑為短小芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus pumilus)。 四、氣體滅菌法
本法系指用化學(xué)消毒劑形成的氣體殺滅微生物的方法。在充有滅菌氣體的高壓腔室內(nèi)進(jìn)行。常用的化學(xué)消毒劑有環(huán)氧乙烷、氣態(tài)過(guò)氧化氫、甲醛、臭氧（O3）等，本法適用于在氣體中穩(wěn)定的物品滅菌。采用氣體滅菌法時(shí)，應(yīng)注意滅菌氣體的可燃可爆性、致畸性和殘留毒性。 本法中**常用的氣體是環(huán)氧乙烷，一般與80％～90％的惰性氣體混合使用。該法可用于醫(yī)療器械，塑料制品等不能采用高溫滅菌的物品滅菌。含氯的物品及能吸附環(huán)氧乙烷的物品則不宜使用。另外，使用氣態(tài)過(guò)氧化氫和臭氧（O3）滅菌，因其無(wú)危害性殘留物，不會(huì)對(duì)操作人員和環(huán)境造成危害，適合于空間和物品表面的滅菌。
采用環(huán)氧乙烷滅菌時(shí)，滅菌柜內(nèi)的溫度、濕度、滅菌氣體濃度、滅菌時(shí)間是影響滅菌效果的重要因數(shù)?？刹捎孟铝袦缇鷹l件： 溫度 （ 54 ±10）℃ 相對(duì)濕度 （60±10）% 滅菌壓力 8×105Pa 滅菌時(shí)間 90min
滅菌條件應(yīng)予驗(yàn)證。滅菌時(shí)，先將滅菌腔室先抽成真空，然后通入蒸汽使腔室內(nèi)達(dá)到設(shè)定的
溫濕度平衡的額定值，再通入經(jīng)過(guò)濾和預(yù)熱的環(huán)氧乙烷氣體。滅菌過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)密監(jiān)控腔室的溫度、濕度、壓力、環(huán)氧乙烷濃度及滅菌時(shí)間。必要時(shí)使用生物指示劑監(jiān)控滅菌效果。本法滅菌程序的控制具有一定難度，整個(gè)滅菌過(guò)程應(yīng)在技術(shù)熟練人員的監(jiān)督下進(jìn)行。滅菌后，應(yīng)采取新鮮空氣置換，使殘留環(huán)氧乙烷和其他易揮發(fā)性殘?jiān)ⅰ２?duì)環(huán)氧乙烷殘留物和反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行監(jiān)控，以證明其不超過(guò)規(guī)定濃度，避免產(chǎn)生毒性。
環(huán)氧乙烷滅菌法驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)進(jìn)行如下試驗(yàn)：泄漏試驗(yàn)，以確認(rèn)滅菌腔室的密閉性；生物指示劑的驗(yàn)證試驗(yàn)，指示劑一般采用枯草芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus subtilis)；滅菌后換氣次數(shù)的驗(yàn)證試驗(yàn)，確認(rèn)環(huán)氧乙烷及相應(yīng)的反應(yīng)產(chǎn)物含量在限定的范圍內(nèi)。驗(yàn)證設(shè)計(jì)時(shí)，還應(yīng)考慮物品包裝材料和滅菌腔室中物品的排列方式對(duì)滅菌氣體的擴(kuò)散和滲透的影響。 五、過(guò)濾除菌法
本法系利用細(xì)菌不能通過(guò)致密具孔濾材的原理以除去氣體或液體中微生物的方法。常用于熱不穩(wěn)定的藥品溶液或原料的除菌。除菌過(guò)濾器采用孔徑分布均勻的微孔濾膜作過(guò)濾材料，微孔濾膜分親水性和疏水性兩種。濾膜材質(zhì)依過(guò)濾物品的性質(zhì)及過(guò)濾目的而定。藥品生產(chǎn)中采用的除菌濾膜孔徑一般不超過(guò)0.22μm。過(guò)濾器不得對(duì)被濾過(guò)成分有吸附作用，也不能釋放物質(zhì)，不得有纖維脫落，禁用含石棉的過(guò)濾器。濾器和濾膜在使用前應(yīng)進(jìn)行潔凈處理，并用高壓蒸汽進(jìn)行滅菌或作在線滅菌。更換品種和批次應(yīng)先清洗濾器，再更換濾膜。 過(guò)濾過(guò)程中無(wú)菌保證與過(guò)濾液體的初始生物負(fù)荷及過(guò)濾器的對(duì)數(shù)下降值LRV(Log Reduction Value)有關(guān)。LRV系指規(guī)定條件下，被過(guò)濾液體過(guò)濾前的微生物數(shù)量與過(guò)濾后的微生物數(shù)量比的常用對(duì)數(shù)值。 即： LRV=lgN0- LgN 式中N0為產(chǎn)品除菌前的微生物數(shù)量。 N 為產(chǎn)品除菌后的微生物數(shù)量。
LRV用于表示過(guò)濾器的過(guò)濾除菌效率，對(duì)孔徑為0.22μm的過(guò)濾器而言，要求每1cm2有效過(guò)濾面積的LRV應(yīng)不小于7。因此過(guò)濾除菌時(shí)，被過(guò)濾產(chǎn)品總的污染量應(yīng)控制在規(guī)定的限度內(nèi)。為保證過(guò)濾除菌效果，可使用兩個(gè)過(guò)濾器串連過(guò)濾，或在灌裝前用過(guò)濾器進(jìn)行再次過(guò)濾。 在過(guò)濾除菌中，一般無(wú)法對(duì)全過(guò)程中過(guò)濾器的關(guān)鍵參數(shù)（濾膜孔徑的大小及分布，濾膜的完整性及LRV）進(jìn)行監(jiān)控。因此，在每一次過(guò)濾除菌前后均應(yīng)作濾器的完整性試驗(yàn)，即氣泡點(diǎn)試驗(yàn)或壓力維持試驗(yàn)或#p#分頁(yè)標(biāo)題#e#氣體擴(kuò)散流量試驗(yàn)。確認(rèn)濾膜在除菌過(guò)濾過(guò)程中的有效性和完整性。除菌過(guò)濾器的使用時(shí)間不應(yīng)超過(guò)一個(gè)工作日，否則應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證。 過(guò)濾系統(tǒng)的驗(yàn)證包括過(guò)濾系統(tǒng)對(duì)過(guò)濾液體的適應(yīng)性、過(guò)濾材料對(duì)溶液的污染程度、過(guò)濾器的規(guī)格、過(guò)濾器的滅菌方法、過(guò)濾系統(tǒng)的完整性試驗(yàn)、生物指示劑試驗(yàn)、過(guò)濾液體的微生物含量控制及過(guò)濾時(shí)間、過(guò)濾器的使用壽命等。上述試驗(yàn)大部分可由濾器的生產(chǎn)廠商來(lái)進(jìn)行。微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn)常用的生物指示劑為缺陷假單胞菌(Pseudomonas diminuta)。
通過(guò)過(guò)濾除菌法達(dá)到無(wú)菌的產(chǎn)品應(yīng)嚴(yán)密監(jiān)控其生產(chǎn)環(huán)境的潔凈度，建議在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行過(guò)濾操作。相關(guān)的設(shè)備、包裝容器、塞子及其它物品應(yīng)采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行滅菌，并防止再污染。 六、無(wú)菌生產(chǎn)工藝
無(wú)菌生產(chǎn)工藝系指必須在無(wú)菌控制條件下生產(chǎn)無(wú)菌制劑的方法，無(wú)菌分裝及無(wú)菌凍干是**常見(jiàn)的無(wú)菌生產(chǎn)工藝。后者在工藝過(guò)程中須采用過(guò)濾除菌法。
無(wú)菌生產(chǎn)工藝應(yīng)嚴(yán)密監(jiān)控其生產(chǎn)環(huán)境的潔凈度，并應(yīng)在無(wú)菌控制的環(huán)境下進(jìn)行過(guò)濾操作。相關(guān)的設(shè)備、包裝容器、塞子及其它物品應(yīng)采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行滅菌，并防止被再次污染。無(wú)菌生產(chǎn)工藝過(guò)程的無(wú)菌保證應(yīng)通過(guò)培養(yǎng)基無(wú)菌灌裝摸擬試驗(yàn)驗(yàn)證，試驗(yàn)結(jié)果的陽(yáng)性率不得超過(guò)0.1%(置信度取95%)。在生產(chǎn)過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)密監(jiān)控生產(chǎn)環(huán)境的無(wú)菌空氣質(zhì)量、操作人員的素質(zhì)、各物品的無(wú)菌性。
無(wú)菌生產(chǎn)工藝應(yīng)定期進(jìn)行驗(yàn)證，包括對(duì)環(huán)境空氣過(guò)濾系統(tǒng)有效性驗(yàn)證及培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)。
生物指示劑
生物指示劑系一類特殊的活微生物制品。可用于確認(rèn)滅菌設(shè)備的性能、滅菌程序的驗(yàn)證、生產(chǎn)過(guò)程滅菌效果的監(jiān)控等。用于滅菌驗(yàn)證中的生物指示劑一般是細(xì)菌的孢子。 1.制備生物指示劑用微生物的基本要求
不同的滅菌方法使用不同的生物指示劑，制備生物指示劑所選用的微生物必須具備以下特性：
(1) (1) 菌種的耐受性應(yīng)大于需滅菌產(chǎn)品中所有可能污染微生物的耐受性。
(2) (2) 菌種應(yīng)無(wú)致病性。
(3) (3) 菌株應(yīng)穩(wěn)定。存活期長(zhǎng)，易于保存。
(4) 易于培養(yǎng)。若使用休眠孢子，生物指示劑中休眠孢子含量要在90%以上。
1. 1. 生物指示劑的制備
生物指示劑的制備應(yīng)按一定的程序進(jìn)行，制備前，需先確定所用微生物的特性，
如D值（微生物的耐熱參數(shù)，系指一定溫度下，將微生物殺滅90%所需的時(shí)間，以分表示）值等。菌株應(yīng)用適宜的培養(yǎng)基（如產(chǎn)孢子的培養(yǎng)基）進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)物應(yīng)制成懸浮液，其中孢子的數(shù)量應(yīng)占優(yōu)勢(shì)，孢子應(yīng)懸浮于無(wú)營(yíng)養(yǎng)的液體中保存。
生物指示劑中包含一定數(shù)量的一種或多種孢子，可制成多種形式，通常是將一定數(shù)量的孢子附著在無(wú)生命的載體上，如濾紙條、玻片、不銹鋼、塑料制品等；孢子懸浮液也可密封于安瓿中；有的生物指示劑還配有培養(yǎng)基系統(tǒng)。生物指示劑應(yīng)選用合適的材料包裝，并設(shè)定 有效期。載體和包裝材料在保護(hù)生物指示劑不被污染和損耗的同時(shí)，還應(yīng)保證滅菌劑穿透并能與生物指示劑充分接觸。載體和包裝應(yīng)設(shè)計(jì)原則是便于貯存、運(yùn)輸、取樣、轉(zhuǎn)移接種。
有些生物指示劑可直接將孢子接種**液體滅菌物或具有與其相似的物理和化學(xué)特性的替代品中。使用替代品時(shí)，應(yīng)用數(shù)據(jù)證明二者的等效性。1. 2. 生物指示劑的應(yīng)用
在滅菌程序的驗(yàn)證中，盡管可通過(guò)滅菌過(guò)程某些參數(shù)的監(jiān)控來(lái)評(píng)估滅菌效果，但生物指示劑的被殺滅程度，則是評(píng)價(jià)一個(gè)滅菌程序有效性**直觀的指標(biāo)?？墒褂檬惺鄣臉?biāo)準(zhǔn)生物指示劑，也可使用由日常生產(chǎn)污染菌監(jiān)控中分離的**耐受微生物制備的孢子。在生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)中，需確定孢子在實(shí)際滅菌條件下的耐受性，并測(cè)定孢子的純度和數(shù)量。驗(yàn)證時(shí)，生物指示劑的微生物用量應(yīng)比日常檢出的微生物污染量大，耐受性強(qiáng)，以保證滅菌程序有更大的安全性。在**終滅菌法中，生物指示劑應(yīng)放在滅菌柜的不同部位。并避免指示劑直接接觸到被滅菌物品。生物指示劑按設(shè)定的條件滅菌后取出，分別置培養(yǎng)基中培養(yǎng)，確定生物指示劑中的孢子是否被完全殺滅。
過(guò)度殺滅產(chǎn)品滅菌驗(yàn)證一般不考慮微生物污染水平，可采用市售的生物指示劑。對(duì)滅菌手段耐受性差的產(chǎn)品，設(shè)計(jì)滅菌程序時(shí)，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)預(yù)計(jì)在該生產(chǎn)工藝中產(chǎn)品微生物污染的水平，選擇生物指示劑的菌種和孢子數(shù)量。這類產(chǎn)品的無(wú)菌保證應(yīng)通過(guò)監(jiān)控每批滅菌前的微生物污染的數(shù)量、耐受性和滅菌程序驗(yàn)證所獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)估 4.常用生物指示劑
(1)濕熱滅菌法：濕熱滅菌法**常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus stearothermophilus，如NCTC 10 007、NCIMB 8157、ATCC 7953)。D值為1.5～3.0min，每片（或每瓶）活孢子數(shù)5×105～5×106個(gè)，在121℃、19min下應(yīng)被完全殺滅。此外，還可使用生孢梭菌孢子(Spores of Clostridium sporogenes如NCTC 8594、NCIMB 8053、ATCC 7955)，D值為0.4～0.8min。 #p#分頁(yè)標(biāo)題#e#
(2)干熱滅菌法：干熱滅菌法**常用的生物指示劑為枯草芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus subtilis，如NCIMB 8058、ATCC 9372)。D值大于1.5min，每片活孢子數(shù)5×105～5×106個(gè)。去熱原驗(yàn)證時(shí)使用大腸桿菌內(nèi)毒素（Escherichia coli endoxin），加量不小于1000細(xì)菌內(nèi)毒素單位。
(3) 輻射滅菌法：輻射滅菌法**常用的生物指示劑為短小芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus pumilus，如NCTC 10 327、NCIMB 10 692、ATCC 27 142)。每片活孢子數(shù)107～108，置于放射劑量25kGy條件下，D值約3kGy。但應(yīng)注意滅菌產(chǎn)品中所負(fù)載的微生物可能比短小芽孢桿菌孢子顯示更強(qiáng)的抗輻射力。因此短小芽孢桿菌孢子可用于監(jiān)控滅菌過(guò)程，但不能用于滅菌輻射劑量的建立。
(4) 氣體滅菌法：環(huán)氧乙烷滅菌**常用的生物指示劑為枯草芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus
subtilis，如NCTC 10 073、ATCC 9372)。氣態(tài)過(guò)氧化氫滅菌**常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus stearothermophilus，如NCTC 10 007、NCIMB 8157、ATCC 7953)。每片活孢子數(shù)1×106～5×106個(gè)。環(huán)氧乙烷滅菌中，枯草芽孢桿菌孢子D值大于2.5min，在環(huán)氧乙烷濃度為600mg/L，相對(duì)濕度為60%，溫度為54℃下滅菌，60min應(yīng)被殺滅。
⑸ 過(guò)濾除菌法：過(guò)濾除菌法**常用的生物指示劑為缺陷假單胞菌(Pseudomonas diminuta,如
ATCC19 146)，用于濾膜孔徑為0.22μm的濾器；黏質(zhì)沙雷菌(Serratin marcescens)(ATCC 14 756)，用于濾膜孔徑為0.45μm的濾器 。 有效期。載體和包裝材料在保護(hù)生物指示劑不被污染和損耗的同時(shí)，還應(yīng)保證滅菌劑穿透并能與生物指示劑充分接觸。載體和包裝應(yīng)設(shè)計(jì)原則是便于貯存、運(yùn)輸、取樣、轉(zhuǎn)移接種。
有些生物指示劑可直接將孢子接種**液體滅菌物或具有與其相似的物理和化學(xué)特性的替代品中。使用替代品時(shí)，應(yīng)用數(shù)據(jù)證明二者的等效性。
1. 2. 生物指示劑的應(yīng)用
在滅菌程序的驗(yàn)證中，盡管可通過(guò)滅菌過(guò)程某些參數(shù)的監(jiān)控來(lái)評(píng)估滅菌效果，但生物指示劑的被殺滅程度，則是評(píng)價(jià)一個(gè)滅菌程序有效性**直觀的指標(biāo)?？墒褂檬惺鄣臉?biāo)準(zhǔn)生物指示劑，也可使用由日常生產(chǎn)污染菌監(jiān)控中分離的**耐受微生物制備的孢子。在生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)中，需確定孢子在實(shí)際滅菌條件下的耐受性，并測(cè)定孢子的純度和數(shù)量。驗(yàn)證時(shí)，生物指示劑的微生物用量應(yīng)比日常檢出的微生物污染量大，耐受性強(qiáng)，以保證滅菌程序有更大的安全性。在**終滅菌法中，生物指示劑應(yīng)放在滅菌柜的不同部位。并避免指示劑直接接觸到被滅菌物品。生物指示劑按設(shè)定的條件滅菌后取出，分別置培養(yǎng)基中培養(yǎng)，確定生物指示劑中的孢子是否被完全殺滅。
過(guò)度殺滅產(chǎn)品滅菌驗(yàn)證一般不考慮微生物污染水平，可采用市售的生物指示劑。對(duì)滅菌手段耐受性差的產(chǎn)品，設(shè)計(jì)滅菌程序時(shí)，根據(jù)經(jīng)驗(yàn)預(yù)計(jì)在該生產(chǎn)工藝中產(chǎn)品微生物污染的水平，選擇生物指示劑的菌種和孢子數(shù)量。這類產(chǎn)品的無(wú)菌保證應(yīng)通過(guò)監(jiān)控每批滅菌前的微生物污染的數(shù)量、耐受性和滅菌程序驗(yàn)證所獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)估。 4.常用生物指示劑
(1)濕熱滅菌法：濕熱滅菌法**常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus stearothermophilus，如NCTC 10 007、NCIMB 8157、ATCC 7953)。D值為1.5～3.0min，每片（或每瓶）活孢子數(shù)5×105～5×106個(gè)，在121℃、19min下應(yīng)被完全殺滅。此外，還可使用生孢梭菌孢子(Spores of Clostridium sporogenes如NCTC 8594、NCIMB 8053、ATCC 7955)，D值為0.4～0.8min。
(2)干熱滅菌法：干熱滅菌法**常用的生物指示劑為枯草芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus subtilis，如NCIMB 8058、ATCC 9372)。D值大于1.5min，每片活孢子數(shù)5×105～5×106個(gè)。去熱原驗(yàn)證時(shí)使用大腸桿菌內(nèi)毒素（Escherichia coli endoxin），加量不小于1000細(xì)菌內(nèi)毒素單位。
(3) 輻射滅菌法：輻射滅菌法**常用的生物指示劑為短小芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus pumilus，如NCTC 10 327、NCIMB 10 692、ATCC 27 142)。每片活孢子數(shù)107～108，置于放射劑量25kGy條件下，D值約3kGy。但應(yīng)注意滅菌產(chǎn)品中所負(fù)載的微生物可能比短小芽孢桿菌孢子顯示更強(qiáng)的抗輻射力。因此短小芽孢桿菌孢子可用于監(jiān)控滅菌過(guò)程，但不能用于滅菌輻射劑量的建立。
(4) 氣體滅菌法：環(huán)氧乙烷滅菌**常用的生物指示劑為枯草芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus
subtilis，如NCTC 10 073、ATCC 9372)。氣態(tài)過(guò)氧化氫滅菌**常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus stearothermophilus，如NCTC 10 007、NCIMB 8157、ATCC 7953)。每片活孢子數(shù)1×106～5×106個(gè)。環(huán)氧乙烷滅菌中，枯草芽孢桿菌孢子D值大于2.5min，在環(huán)氧乙烷濃度為600mg/L，相對(duì)濕度為60%，溫度為54℃下滅菌，60min應(yīng)被殺滅。⑸ 過(guò)濾除菌法：過(guò)濾除菌法**常用的生物指示劑為缺陷假單胞菌(Pseudomonas diminuta,如
ATCC19 146)，用于濾膜孔徑為0.22μm的濾器；黏質(zhì)沙雷菌(Serratin marcescens)(ATCC 14 756)，用于濾膜孔徑為0.45μm的濾器 。 </FONT< p>#p#分頁(yè)標(biāo)題#e#
常用滅菌法 一、物理滅菌法：
（一）熱力滅菌法：1、干熱滅菌法： 是利用火焰或干熱空氣進(jìn)行滅菌，大多用于用具及器皿等。 2、濕熱滅菌法：(1)熱壓滅菌法：用飽和水蒸汽排盡空氣后，在一定溫度和壓力下進(jìn)行滅菌。水蒸汽壓力與溫度對(duì)應(yīng)如下：
20.594(kpa)-105.7℃，34.3233-108.8℃，41.1879-110.3℃，68.6466-115.5℃，75.1121-116.8℃，96.1052-120.2℃……
(2)流通蒸汽滅菌法和煮沸滅菌法：100℃，適用于不耐高溫的藥劑。
(3)低溫間歇滅菌法：80℃加熱1小時(shí)，20～25℃下放置24小時(shí)，連續(xù)操作三次以上，適用于不耐熱藥劑，滅菌效果差，須加防腐劑。
（二）過(guò)濾滅菌法：1、垂熔玻璃濾器：G際標(biāo)準(zhǔn)為P250～P2，濾過(guò)粒子由大到小。P2可濾除大腸桿菌及葡萄球菌。
2、微孔濾膜：我G為醋酸纖維素酯濾膜，或硝酸纖維素酯與醋酸纖維素酯的混合纖維素酯濾膜。特性：耐120℃30分鐘滅菌；無(wú)脫屑；不耐堿；不耐有機(jī)溶劑；易燃。孔徑 5.0mm用于注射液初濾，0.8mm用于精濾，0.45mm可濾去大多數(shù)細(xì)菌，0.15mm可濾去熱原。
（三）紫外線滅菌法：波長(zhǎng)200～300nm，易穿透潔凈的水和空氣，用于空氣和物體表面滅菌。紫外線燈有效使用期一般為3000小時(shí)。 紫外線照射時(shí)間對(duì)微生物殺滅率見(jiàn)表： 照射時(shí)間（小時(shí)） 殺 滅 率 （%）
（四）微波滅菌法：為300～3000兆赫的電磁波。水可強(qiáng)烈吸收微波，使極性分子轉(zhuǎn)動(dòng)摩擦而產(chǎn)熱。能穿透物質(zhì)較深部，滅菌效果好。有望用于注射液的滅菌。
（五）輻射滅菌法：又稱電離輻射，是用g-射線或b-射線照射殺菌。前者由鈷-60或銫-137發(fā)出，穿透力強(qiáng)；后者由電子加速器產(chǎn)生，帶電荷，穿透力弱，滅菌效果差。對(duì)于輻射，無(wú)芽胞菌比有芽胞菌敏感得多；無(wú)芽胞菌中革蘭氏陰性菌比陽(yáng)性菌敏感；而病毒敏感性很差。此外，輻射能引起一些藥物pH值、含量、活性等改變，某些制品不宜選用。
二、化學(xué)滅菌法：一般以噴灑（霧）、蒸發(fā)等方法進(jìn)行滅菌。
（一）環(huán)氧乙烷：無(wú)色醚樣臭味氣體，沸點(diǎn)10.8℃，沸點(diǎn)以下為無(wú)色透明液體，比重0.882，溶于水。擴(kuò)散穿透能力強(qiáng)，屬?gòu)V譜殺菌劑。用于對(duì)熱敏感的藥物、塑料、橡膠、皮革制品、皮料、紙張以及小型玻璃器皿等的滅菌。
（二）過(guò)氧乙酸：無(wú)色透明液體，有刺激性醋酸臭和味，易揮發(fā)，有腐蝕性。易溶于水、乙醇、乙醚、醋酸。可緩慢分解，急劇分解時(shí)會(huì)爆炸。但40%以下的溶液則不會(huì)。本品廣譜、高效、速效，毒性低，0.5%溶液用于空氣（噴霧30ml/m3）、器械和皮膚消毒，臨用前配制。
（三）其它：1、苯酚（石炭酸）：3～5%地面、墻壁噴撒。 2、甲酚皂溶液（來(lái)蘇爾）：5～100%地面、墻壁噴撒。
3、甲醛溶液（福爾馬林）：20ml/m3加熱蒸發(fā),6～12小時(shí)。 4、乳酸：1ml/m3加熱蒸發(fā)0.5～1小時(shí)。 5、苯扎溴銨：1/1000～1/2000溶液噴撒地面、墻壁。 6、丙二醇：1ml/m3加熱蒸發(fā)
